Biokemijska metoda istraživanja

Biokemijska metoda smatra se glavnom metodom za kvalitativnu dijagnozu različitih bolesti. Analizirajte značajke ove dijagnoze, opseg.

Predmeti dijagnoze

Trenutno je biokemijska dijagnostička metoda povezana s proučavanjem znoja, urina i drugih bioloških tekućina. Uz to, možete identificirati aktivnost enzima, saznati količinski sadržaj metaboličkih produkata u različitim biološkim tekućinama.

Biokemijska metoda omogućuje određivanje poremećaja koji nastaju u metabolizmu zbog nasljednih čimbenika.

Povijest otkrića

Početkom dvadesetog stoljeća, engleski liječnik A. Garrod bio je angažiran u istraživanju alkaptonurija. Uspio je utvrditi da je zbog odsutnosti određenih enzima moguće utvrditi metaboličke poremećaje, kao i utvrditi prirodni metabolizam.

Različite nasljedne bolesti uzrokovane su različitim mutacijama u genima, što dovodi do promjene u brzini sinteze proteinskih molekula, promjena u njihovoj strukturi. Kao rezultat takvih promjena, dolazi do kršenja metabolizma lipida, proteina, ugljikohidrata.

Biokemijska metoda omogućuje analizu kemijskog sastava tkiva i materijala.

U slučaju patologije mogu postojati promjene u koncentraciji, kao i neke dodatne komponente. Ova metoda omogućuje određivanje enzima, proučavanje hormonalne ravnoteže.

klasifikacija

Biokemijska metoda podijeljena je na kvalitativne i kvantitativne opcije. Za kvalitativno određivanje korištenih svojstava koja su karakteristična za upotrijebljenu tvar, mogu se pojaviti tijekom kemijskih reakcija: zagrijavanje, dodavanje nekih reagensa.

Kvantitativna biokemijska metoda uključuje početnu detekciju tvari, zatim kvantitativni izračun.

Medijatori, hormoni sadržani u ljudskom tijelu u maloj količini, otkriveni su uz pomoć ispitnih predmeta.

Zanimljivi trenuci

Metoda biokemijskog istraživanja stalno se poboljšava, što omogućuje dobivanje rezultata maksimalne točnosti na metaboličke procese koji se odvijaju u stanicama i organima. Trenutno se takve dijagnostičke tehnike kombiniraju s drugim istraživačkim metodama, primjerice histološkim, imunološkim, citološkim analizama.

Za primjenu složenih tehnika primijenite specijaliziranu opremu.

Biokemijske metode analize omogućuju razvoj i primjenu brze i pojednostavljene metode koja omogućuje određivanje procjene specifičnih biokemijskih parametara u nekoliko minuta.

Trenutno su analitički laboratoriji opremljeni suvremenom opremom, automatskim instrumentima i sustavima koji omogućuju maksimalnu točnost identifikacije potrebnog indikatora.

Načini

Biokemijska metoda istraživanja omogućuje vam da na različite načine odredite bilo koju tvar u biološkim tekućinama. Na primjer, možete identificirati takav indikator kao kolesterol esteraza pomoću moderne opreme. Pri odabiru određene tehnike uzima se u obzir priroda analiziranih bioloških tekućina.

Metoda biokemijske studije koristi se za identificiranje određene tvari u jednoj verziji, kao i za proučavanje dinamike promjena. Ovaj se pokazatelj analizira na određenom opterećenju, privremenom pokazatelju, u procesu uzimanja određenih kemijskih pripravaka.

Specifičnosti metode

Biokemijska metoda genetike osigurava brzu analizu biološkog materijala. Pogodan je za ponovnu uporabu, omogućuje analizu kromosomskih struktura, identificiranje njihovog kariotipa. Pomoću ove tehnike stručnjaci prepoznaju monogene i nasljedne bolesti povezane s polimorfizmima i mutacijama gena, kao i njihove strukture.

Suvremene biokemijske metode koriste se za pronalaženje novih oblika mutiranih alela u DNA. Zahvaljujući ovoj tehnici otkriveno je tisuću bolesti povezanih s metaboličkim procesima. Mnogi od njih su problemi povezani s defektima enzima, kao i promjene u strukturnim proteinima.

Za dijagnozu poremećaja metabolizma koriste se dvije faze. Najprije napravite izbor mogućih slučajeva bolesti. Zatim razjašnjavaju početnu dijagnozu, naoružani sofisticiranim i preciznim tehnikama i opremom.

Primjerice, u prenatalnom razdoblju dijagnoza nasljednih bolesti provodi se u novorođenčadi metodom biokemijske analize. To omogućuje pravodobno otkrivanje patoloških promjena i odmah započinje liječenje.

Vrste biokemijskih analiza

Kako je biokemijska metoda? Definicija raznih kemikalija provodi se na različite načine. Suština tehnike je identificirati određene biokemijske proizvode. Razlog tome je promjena u djelovanju različitih alela. Načelo definiranja je identificirati izmijenjeno nukleinske kiseline i proteini primjenom gel elektroforeze, zajedno s drugim tehnikama: autoradiografija, blot hibridizacija.

Biokemijska analiza omogućuje identificiranje heterozigotnih nositelja različitih bolesti. Zbog mutacijskih procesa koji se odvijaju u ljudskom tijelu, pojavljuju se kromosomske preraspodjele koje negativno utječu na ljudsko zdravlje.

Osim toga, moderne biokemijske dijagnostičke tehnike omogućuju određivanje različitih polimorfizama, kao i uzroka mutacija različitih gena.

Među uobičajenim metodama suvremene biokemije odabiremo centrifugiranje, dijalizu i kromatografiju.

Optičke metode istraživanja

Apsorpcijska spektroskopija temelji se na principu određivanja apsorbirane svjetlosti koja prolazi kroz otopinu analita kao rezultat apsorpcije.

Za mjerenje spektra korišteni su specijalni spektralni uređaji. Stavili su uzorak analiziranog lijeka između fotoćelije i izvora svjetlosti. Svaka biološka tvar ima određenu apsorpcijsku svjetlost.

Za korištene analitičke studije valna duljina što odgovara maksimalnoj apsorpciji analita.

Fotoelektrokolorimetrija je definicija vidljivog fragmenta spektra obojenim otopinama.

Spektrofotometrija, potrebna u suvremenoj analizi, definicija je prijenosa (apsorpcije) prozirnih tekućina u vidljivim, ultraljubičastim i infracrvenim područjima spektra.

Među glavnim instrumentima koji se koriste za mjerenje, odaberite spektrofotometre i fotoelektrokolorimetre. Ovi tehnički uređaji omogućuju precizna mjerenja u velikom rasponu valnih duljina, od ultraljubičastog do infracrvenog područja spektra.

Elektroforeza u modernoj medicini

Ovaj fenomen uključuje kretanje nabijenih čestica u električnom polju. Njihovo ponašanje može se opisati s tri osnovne značajke: brzina čestica, elektroforetska pokretljivost, elektrokinetički potencijal.

Među brojnim metodama koje se koriste za provođenje analitičkih ispitivanja, elektroforeza omogućuje odvajanje smjesa tvari u odvojene frakcije, kako bi se izvršila njihova kvantitativna i kvalitativna određenost. Na primjer, slična tehnika može se koristiti za razdvajanje proteina. krvni serum na albumin i četiri frakcije globulina. Takav problem često se rješava u kliničkoj biokemiji, budući da definicija patoloških procesa koji se odvijaju u tijelu pacijenta ovisi o omjeru frakcija.

Trenutno se provodi slobodna (frontalna) elektroforeza povezana s tekućim medijem, kao i zonalna varijanta u podupirućim medijima. Mogu biti porozni inertni sintetički ili prirodni materijali: škrob, celuloza acetat, papir, sintetski poliakrilamidni gel.

Zadatak takvog okruženja je stabiliziranje tekućine, smanjenje difuzije, stvaranje dodatnog mehanizma razdvajanja.

U novije vrijeme, razdvajanje molekularnih težina korišteno je zajedno s elektroforetskom pokretljivošću.

Raznolikost moderne analize

Elektroforeza diska je metoda visoke razlučivosti. Njegova suština leži u činjenici da se u početku kretanje molekula provodi kroz gel za koncentriranje velikih pora, gdje se odvajanje smjese provodi kroz kretanje između različitih vrsta iona. Razlučivanje metode postiže se koncentriranjem prije razlaganja uzorka na malom polaznom području, pri čemu se tvari koje se razlikuju po svojim svojstvima dijele.

Kromatografske metode temelje se na dinamičkoj podjeli mješavine bioloških tvari. Njihova suština je da protok mobilne faze, koja sadrži analit, prolazi kroz stacionarnu fazu, što je praćeno interakcijom s komponentama uzorka. Faze za ovu analizu su odabrane tako da se koeficijenti raspodjele komponenti smjese razlikuju.

Ovisno o stanju agregacije mobilne faze, kromatografske metode se dijele na tekuće i plinovite vrste. Uzimajući u obzir geometrijski oblik stacionarne faze, izolirana je planarna i kolonska kromatografija.

U skladu s mehanizmom odvajanja bioloških pripravaka, trenutno se razlikuje adsorpcijska kromatografija koja se temelji na različitom adsorpcijskom kapacitetu komponenti podijeljene tekućine na granici između dvije faze.

Distributivna ili adsorpcijska kromatografija temelji se na različitoj sposobnosti apsorpcije volumena tekuće faze komponenti analizirane smjese.

zaključak

Za ranu dijagnozu ozbiljnih bolesti potrebna je biokemijska analiza. Na primjer, u kromatografiji afiniteta, specifična komponenta se može izolirati iz bilo koje biološke smjese.

Slična tehnika se koristi za pročišćavanje antitijela i antigena, receptora, enzima, hormona. Posebnu ulogu u biokemiji ima centrifugiranje. Proučavanje i odvajanje tvari na temelju ove metode temelji se na različitim brzinama sedimentacije (sedimentacije) u centrifugalnom polju čestica koje imaju različitu gustoću, veličinu, oblik. Uz pravilan odabir brzine centrifugiranja, možete precipitirati mitohondrije, ribosome, lizosome.

Radioizotopne metode temelje se na mogućnosti da nestabilni izotopi emitiraju elektromagnetsko zračenje ili čestice, fiksirane pomoću posebnih elektroničkih uređaja.

Među jasnim prednostima svih modernih metoda koje se koriste u medicini, istaknut ćemo sposobnost analize metaboličkih transformacija, identificirati dob bioloških pripravaka. Takve studije pomažu u pravodobnom liječenju pacijenata.