Kako se serološki testovi koriste za dijagnozu?

Serologija (od latinskog Serum - serum) naziva se znanost o svojstvima krvni serum osoba. Definicija seroloških reakcija bit će prikazana u nastavku.

Jedan od glavnih zadataka serologije danas je razvoj metoda za proizvodnju specifičnih seruma za dijagnostiku i liječenje, procjenu stupnja njihove aktivnosti i određivanje mehanizama izloženosti ljudi. Serološki test krvi je laboratorijska metoda za određivanje antigena ili antitijela (specifičnih proteina) u pacijentovom krvnom serumu. Serološke studije se ne smatraju 100% specifičnim i osjetljivima u dijagnostici zaraznih bolesti. Stoga je evaluacija rezultata istraživanja moguća samo ako se uzme u obzir klinička slika bolesti u cjelini. Stručnjaci preferiraju točniju dijagnozu nekoliko testova.

Serološke reakcije - što je to?

U laboratorijskoj dijagnostici većine zaraznih bolesti, metoda se koristi za otkrivanje protutijela u krvi pacijenta koja se stvaraju protiv patogenih antigena. Koriste se u medicinskoj praksi od početka dvadesetog stoljeća. S razvojem znanosti, moderni liječnici su naučili identificirati antigene u strukturi mikroba, a također su otkrili kemijsku formulu njihovih toksina. To je omogućilo razvoj seruma namijenjenih ne samo za liječenje, nego i za dijagnosticiranje zaraznih bolesti. Serum se proizvodi primjenom atenuiranih patogena laboratorijskim životinjama. Postavljanje seroloških reakcija sada je vrlo popularno.

Nakon standardnog vremena izlaganja, pripravci se pripremaju iz krvi laboratorijskih životinja. Upotrebljavaju se u serološkim reakcijama za identifikaciju mikroba ili njihovih toksina. Metoda se temelji na imunološkom odgovoru ljudskog tijela. Ova se studija koristi u dijagnostici infektivnih bolesti radi utvrđivanja prisutnosti ili odsutnosti antitijela u bolesnika protiv virusa ili bakterija, kao i za određivanje krvne skupine. Vanjske manifestacije seroloških reakcija ovise o uvjetima ponašanja i stanju u kojem se antigeni nalaze u krvi pacijenta. Ako se mikrobi ne otope, oni će se taložiti, lizirati, vezati ili imobilizirati u serumu. Ako dođe do otapanja antigena, tada se otkrije fenomen neutralizacije ili taloženja. Serološke reakcije su se koristile dugo vremena.

Materijal za učenje

Kada se provodi serološka studija pomoću čestica biološkog materijala prikupljenih od pacijenta: krv, slina, feces. U velikom broju slučajeva ispituje se materijal prikupljen u nekim okolišnim objektima: voda, zemlja.

Kako se u mikrobiologiji točno provode serološke reakcije?

Način prikupljanja biološkog materijala

S ovom analizom nije potrebno posebno pripremiti pacijenta. Uzimanje uzoraka krvi provodi se ujutro prije obroka u sobi za liječenje medicinske ustanove standardnim hematološkim metodama. Za ovu analizu, uzorkovanje krvi se provodi na dva načina: venska krv se uzima iz kubitalne vene, a kapilarna krv se uzima iz prsta. Materijal za analizu je u sterilnim zatvorenim cijevima.

Što je potrebno za postavljanje seroloških reakcija?

Značajke transporta i skladištenja biološkog materijala

Odmah nakon uzimanja krvi transportira se u poseban laboratorij, gdje se isti dan priprema serum. Možete ga pohraniti ne više od četiri ili šest dana u hladnjaku na temperaturi od 2 do 4 stupnja. Ako želite zadržati serum duže vrijeme, on je zamrznut. Kako ne bi narušili kvalitetu biološkog materijala, zamrzavanje i odmrzavanje može se obaviti samo jednom. Dugotrajno skladištenje čini antitijela neaktivnima i oni gube neka od svojih svojstava. Smatra se da su imunoglobulini klase M najosjetljiviji na niže temperature skladištenja.

Nakon odmrzavanja sirutke, dobro se promiješa da se dobije homogeni sastav. Pomaže u vraćanju koncentracije antitijela sadržanih u ovom materijalu.

Serološke studije - za što se koriste?

Metoda seroloških reakcija koristi se za dijagnosticiranje ehinokokoze, trihinoze, toksokaroze, opisthorchiasis, cisticerkoze, toksoplazmoze, amebijaze, giardijaze. To je potrebno kako bi se utvrdila djelotvornost propisanog tijeka liječenja, kao i otkrivanje recidiva bolesti koja je uslijedila nakon oporavka pacijenta. Gdje se najčešće koristi serološke reakcije?

Osnovne dijagnostičke metode

Mikrobiolozi i imunolozi u većini slučajeva primjenjuju reakciju aglutinacije, taloženja, neutralizacije, reakcije uz sudjelovanje komplementa, koristeći obilježena antitijela i antigene (radioimunološke, imunofermentalne, imunofluorescentne metode).

Aglutinacijska reakcija (RA)

Test serološke aglutinacije provodi se jednostavno i istodobno vrlo jasno. To vam omogućuje da brzo utvrdite sadrži li antigeni serum pacijenta. Reakcija se koristi za dijagnosticiranje tifus paratifa i tifusa. Temelji se na specifičnoj interakciji između ljudskih antitijela (aglutinina) i mikroba (aglutenogena). U procesu njihove interakcije formira se čestica. Ovo je pozitivan znak. Za reakciju možete koristiti žive ili ubijene mikrobne tvari, gljivice, protozoe, krvne stanice i somatske stanice. Kemijska ispitivanja provode se s razdvajanjem u dvije faze: u prvom stupnju protutijela se pomiješaju s antigenima, nakon čega slijedi taloženje (nastaje aglutinat) tijekom reakcije.

Serološka dijagnostička metoda može biti različita.

Reakcijska indirektna aglutinacija (RPGA)

Ova reakcija se smatra osjetljivijom od prethodne. Koristi se za dijagnosticiranje bolesti koje uzrokuju različite bakterije, intracelularni paraziti, protozoe. Ova analiza može detektirati koncentraciju antitijela, čak iu vrlo malim količinama. Za njegovu provedbu potrebno je koristiti pročišćene crvene krvne stanice od ovaca i ljudskih crvenih krvnih stanica, prethodno tretiranih antitijelima ili antigenima (ovisno o tome što žele pronaći u laboratoriju). U nekim slučajevima, upotrebom ljudskih crvenih krvnih stanica imunoglobulina. Smatra se da se serološka reakcija crvenih krvnih stanica održava ako se crvena krvna zrnca talože na dnu epruvete. Kada se stanice nalaze u obliku obrnute kupole i zauzimaju cijelo dno cijevi, to ukazuje na pozitivnu reakciju. Smatra se negativnom reakcijom ako se crvene krvne stanice deponiraju u obliku stupca ili gumba u sredini dna.

Provodi se serološki test za sifilis.

Reakcijska oborina (RP)

Da bi se identificirale ekstremno male čestice antigena, koristi se reakcija taloženja. To može biti protein (ili njegov dio), spojevi proteina, lipida ili ugljikohidrata, djelomično zastupljene bakterije i njihovi toksini. Serum za analizu pomoću ove reakcije dobiva se infekcijom laboratorijskih životinja, obično kunića. Ova metoda se koristi za dobivanje gotovo bilo kojeg precipitacijskog seruma.

Mehanizam serološke reakcije taloženja sličan je učinku aglutinacijske reakcije. Antitijela koja su sadržana u serumu pomiješana su s antigenima u otopina koloida povezivanje s velikim proteinskim molekulama. Ove molekule se talože na dnu epruvete ili na gel supstratu. Smatra se da je ova verzija studije vrlo točna, te se uz njezinu pomoć mogu otkriti i zanemarive doze tvari. Reakcija taloženja, koja se također široko koristi u sudskoj medicini, omogućuje dijagnosticiranje kuge, tularemije, antraksa, meningitisa.

Reakcije ovog tipa provode se ne samo u tekućem mediju, već za to koriste i agar gel. Ovaj postupak naziva se metoda difuzne oborine. Pruža mogućnost istraživanja kompleksnih antigenskih smjesa. U gelu se protutijela i antigeni kreću jedan prema drugome različitim brzinama i, nakon sastanka, stvaraju linije oborina uz koje se donosi zaključak.

Što je još poznata metoda serološke reakcije?

Neutralizacijska reakcija (PH)

Anti-toksični serumi neutraliziraju djelovanje egzotoksina koje proizvode mikroorganizmi. Ovaj serološki odgovor temelji se na toj interakciji. U mikrobiologiji se ova metoda koristi za titraciju seruma, toksina i toksoida, kao i za određivanje njihove terapeutske aktivnosti. Dodatno, koristeći ovu reakciju, možete odrediti identitet egzotoksina određenom tipu ili tipu. Tetanus, difterija i botulizam se dijagnosticiraju na ovaj način. Ispitivanje se provodi i na tableti i u supstratu gela.

Također, serološke reakcije koriste se i za druge testove.

Reakcija lize (RL)

Serum koji ulazi u tijelo pacijenta dobiva, osim glavnog funkcionalnog zadatka osiguravanja pasivne imunosti, svojstva otapanja. Doprinosi rastvaranju mikroba, staničnih stranih elemenata i virusa koji ulaze u tijelo pacijenta. Ovisno o sastavu antitijela, serum se dijeli na bakteriolizine, citolizine, spirohetolizine, hemolizine i druge. Ta se antitijela nazivaju komplimenti. Antitijela sadrže gotovo sve tekućine u ljudskom tijelu, imaju kompleksnu strukturu proteina i vrlo su osjetljive na povišenu temperaturu, trešnju, izloženost kiselini i izravnoj sunčevoj svjetlosti. Ali u suhom stanju mogu zadržati svojstva liziranja do 6 mjeseci.

Izvršene su sljedeće serološke reakcije ove vrste krvi: bakterioliza, hemoliza.

Reakcija bakteriolize provodi se pomoću pacijentovog seruma i specifičnog imunog seruma s aktivnim mikroorganizmima. Ako postoji dovoljno komplimenta u krvi, laboratorijski tehničar će svjedočiti lizi bakterija, a reakcija će se smatrati pozitivnom. Drugi tip ove vrste serološke reakcije je da se eritrociti pacijenta obrađuju serumom koji sadrži hemolizine, koji se aktiviraju samo ako postoji kompliment. Ako je prisutan, istraživač će promatrati rastvaranje crvenih krvnih stanica. Ova metoda se koristi pri izvođenju Wassermanove reakcije (sifilis).

Reakcija uzajamnog pristanka (RSK)

Ova se studija koristi za otkrivanje antitijela za infekciju u krvi pacijenta i za identifikaciju patogena po njihovoj antigenskoj strukturi. Sve prethodno opisane reakcije smatraju se jednostavnim. CSC je složena reakcija, budući da ne uključuje dvije, nego tri komponente: antitijelo, antigen i kompliment. Suština se sastoji u interakciji između antitijela i antigena, koji se javlja samo u prisutnosti komplementnih proteina, adsorbiranih na vrhu formiranog kompleksa AG-AT. Antigeni nakon dodavanja komplimenta značajno se mijenjaju, upravo te transformacije pokazuju kvalitetu reakcije. To može biti liza, hemoliza, imobilizacija, baktericidno ili bakteriostatično djelovanje.

Gornje reakcije se međusobno razlikuju tehnikom proizvodnje, ali sve one u osnovi imaju reakciju interakcije antigen-antitijelo i koriste se za njihovu identifikaciju. Postoji nekoliko vrsta seroloških reakcija sa sličnim principom djelovanja.