ELISA analiza: transkript

Enzimski imunotest (ELISA) je metoda ispitivanja krvi u laboratoriju, temeljena na potrazi za posebnim stanicama - antitijelima za različite bolesti. Metoda omogućuje ne samo identificiranje patogena, već i utvrđivanje u kojoj je fazi patološki proces. Potonje je vrlo važno za prognozu i daljnje liječenje pacijenta.

Prednosti i nedostaci metode

Među svim modernim dijagnostičkim metodama, ELISA je najinovativnija i tehnički točnija. Njegove glavne prednosti su:

1. Sposobnost traženja svih postojećih antitijela na zarazne bolesti u krvi pacijenta.
2. Visoka dostupnost istraživačke metode. Do danas, bilo koji laboratorij srednje veličine može provesti ELISA analize.
3. Gotovo 100% specifičnost i osjetljivost metode.
4. Sposobnost traženja antitijela i antigena, kao i utvrđivanje stupnja patološkog procesa i praćenje njegove dinamike, zbog usporedbe broja.

Ovakav broj prednosti u odnosu na druge testove u potpunosti nadmašuje jedan nedostatak analize: on je u stanju otkriti antitijela, ali ne i sam patogen.

Ključni pojmovi za procjenu analize

Da biste razumjeli što se događa s ELISA analizom, što je to i kako se izvodi, morate se upoznati s osnovnim pojmovima koje koriste stručnjaci.

1. Antitijelo je protein kojeg proizvode stanice. imunološki sustav humani (limfociti tipa B). Odgovaraju specifičnom reakcijom na ingestiju stranog sredstva ili tvari. Drugi naziv za antitijela su imunoglobulini, oni pripadaju različitim klasama: A, E, M, G. Oni se međusobno razlikuju po masi, brzini odgovora, poluživotu i brojnim drugim značajkama. Ljudska krv obično sadrži uglavnom imunoglobuline klase G. Ako dođe do bilo kakve infekcije, broj imunoglobulina A i M naglo se povećava. Imunoglobulini E sudjelovati u alergijskim reakcijama.
2. Antigen je strani agens organskog porijekla i visoka molekularna težina. Najčešće predstavljaju patogene ili njihove biološki aktivne tvari.
3. Kompleks antigen-antitijelo, ili imunološki kompleks, je izravna kombinacija strane tvari i imunoglobulina, što dovodi do imunološkog odgovora.

Suština i opseg metode

Pacijenti često imaju pitanje: ELISA, što je to, kako se izvodi i za što je? O metodi možete ukratko opisati njezine faze.

Pripremna faza . Laboratorijski liječnik koristi posebnu tabletu, u kojoj je 96 rupa. Antigen specifičnog patogena primijenjen je na površinu svake jažice.

Faza 1. Provodi se uzorkovanje krvi, koje se zatim kap po kap nanosi u bunar. U jažici se započinje reakcija između antigena i antitijela u krvi.

Faza 2. U bušotini je u tijeku reakcija s formiranjem imunih kompleksa. Rezultat je supstanca određene boje. Intenzitet bojenja ovisi o količini protutijela u krvi pacijenta za svaki specifični patogen.

Faza 3. Evaluacija rezultata fotometrijom. Da biste to učinili, koristite poseban uređaj pod nazivom "spektrofotometar". Upotrebljava se za usporedbu gustoće materijala u bušotini i kontrolnog uzorka. Zatim uređaj generira rezultat matematičkom analizom.

Evaluacija rezultata i svrha ELISA testa

Tumačenje rezultata ovisi o nekoliko važnih nijansi:

1. Bušotine optičke gustoće.
2. Proizvođač ploča s rupama (ispitni sustavi).
3. Laboratorij u kojem je provedena studija.

S obzirom na ove nijanse, nikada ne biste trebali uspoređivati ​​dva rezultata iz različitih sustava za testiranje ili iz različitih laboratorija.

Druga važna točka koja utječe na analizu ELISA je tzv. Aviditet antitijela. Ovaj parametar karakterizira količinu antigena, jačinu veze u kompleksu "antigen-antitijelo". Temelj njegove definicije je obrada kompleksa imunog ureje u cilju rješavanja proteinskih struktura. To vam omogućuje da uništite slabe veze između antigena i antitijela i ostavite samo jake. Vrijednost istraživanja o avidnosti je da se može koristiti za utvrđivanje trajanja infekcije. Ova informacija je izuzetno važna za postavljanje dijagnoze trudnicama.

Test krvi ELISA-om je:

1. Tražiti različite antigene patogena.
2. Za proučavanje razine hormona.
3. Za ispitivanje prisutnosti autoimune patologije.
4. Za otkrivanje biljega raka.

Vrste ELISA testova

ELISA analiza ima sljedeće vrste:

1. Neizravno.
2. Izravno.
3. Konkurentna.
4. Metoda blokiranja

Zapravo, danas se koristi samo metoda nazvana ELISA (enzimski imunosorbentni test). Temelji se na gore opisanoj reakciji stvaranja kompleksa antigena s antitijelom s promjenom boje na površini jažice.

Kvantitativni ELISA test krvi zaslužuje posebnu pozornost. To nije vrsta analize, već način procjene rezultata. Zahvaljujući njemu, broji se broj protutijela i određuju njihove klase. Rezultat ovisi o optičkoj gustoći uzorka, ispitnom sustavu na kojem je provedena ELISA, te o laboratoriju.

Bolesti otkrivene ELISA-om

ELISA je test krvi koji vam omogućuje identificiranje velikog broja različitih zaraznih bolesti. Štoviše, s istom točnošću otkrivene su i virusne i bakterijske bolesti. Primjerice, pomoću formiranja imunih kompleksa može se dokazati prisutnost antigena uzročnika sljedećih bolesti:

1. Virusni hepatitis A, B i C.
2. HIV infekcija i AIDS.
3. Epstein-Barr virus.
4. Herpes virus svih vrsta.
5. Citomegalovirus.
6. Ospice.
7. Toksoplazmoza.
8. Sifilis i mnoge spolno prenosive bolesti.
9. Parazitoza i druge bolesti.

Osim toga, ELISA može detektirati:

1. Markeri raka - TNF (faktor tumorske nekroze), PSA (antigen specifičan za prostatu), CEA (antigen embrionalnog karcinoma), CA-125 (tumorski tumor jajnika)
2. Trudnoća Hormon - hCG (horionski gonadotropin).
3. Poremećaji reproduktivnog sustava: hormoni ženskog i muškog reproduktivnog sustava.
4. Patologija štitne žlijezde.

Važno je napomenuti da je ELISA test za HIV danas glavni način dijagnosticiranja ove opasne bolesti.

Materijal za ELISA i tehnologiju ograde

Za izvođenje ELISA testa kod pacijenta, uzima se krv na prazan želudac. Nadalje, serum se dobiva iz krvi, koja se izravno koristi za analizu. Osim toga, ELISA se može provesti na cerebrospinalnoj tekućini (CSF), sluz cerviksa kanal (cerviks), amnionska tekućina, pa čak i staklasta tekućina (očna jabučica).

Prije davanja krvi pacijentu, upozoravaju se da ne smije uzimati nikakve lijekove, te se preporuča završiti liječenje antibioticima i antivirusnim lijekovima najmanje dva tjedna prije uzimanja krvi.

Vrijeme primitka i tumačenja rezultata

Vrijeme primitka odgovora iz laboratorija ne ovisi o brzini njegovog rada, već u kojoj je fazi bolest i koja su se antitijela već pojavila u krvi. Tako, na primjer: M imunoglobulini se pojavljuju približno 2 tjedna nakon uzimanja krvi za analizu i znače da je proces u fazi primarne infekcije ili da je došlo do pogoršanja kroničnog. Istodobno se tijekom primarne infekcije pojavljuju antitijela klase M i G. Štoviše, potonje se može otkriti nakon 4 tjedna.

IgA se pojavljuje nakon 2-3 tjedna bilo samostalno ili s M, što znači akutna infekcija, ili s G, što ukazuje na kronični proces.

Takva različita razdoblja pojave antitijela u krvi uzrokovat će dugo čekanje pacijenta na rezultat. Prihvatljivo je čekati više od mjesec dana nakon provedbe ELISA testa. Dekodiranje i tumačenje od strane liječnika također traje određeno vrijeme.