Srijeda Endo. Sastav i priprema hranjivog medija

Svaki ljubitelj mikrobiologije zna da uzgoj bilo koje kolonije zahtijeva odgovarajući hranjivi medij. U isto vrijeme, svaki hranjivi medij ima svoje karakteristike, kako u pripremi tako iu uporabi. Ako odlučite uzgojiti koloniju enterobakterija, trebat će vam Endo okolina. To je upravo ono o čemu ovaj članak govori.

Što je ovaj hranjivi medij?

Okoliš Endo se koristi za uklanjanje enterobakterija i ima diferencijalni dijagnostički karakter. Zašto se tako zove? Vrlo je jednostavna - nazvana je po svom otkrivaču - Shigeru Endu. Ovo je poznati mikrobiolog japanskog podrijetla.

Koja je osobitost ovog okruženja?

Nije tajna da u mikrobiologiji postoji koncept gram-pozitivnih i gram-negativnih bakterija. Dakle, ako odlučite uzgojiti koloniju gram-negativnih bakterija, za to vam je potrebna okolina koja će inhibirati rast gram-pozitivnih bakterija. Ovom značajkom lako se može rukovati u Endo okruženju. Zbog svojih selektivnih svojstava sprječava razvoj gram-pozitivnih kolonija.

Srednji sastav

Karakteristike bilo kojeg okoliša ovise prvenstveno o sastojcima. Sastav okoliša Endo uključuje:

• natrijev sulfat;
• natrijev fosfat;
• mesni peptonski agar;
• magenta;
• natrijev karbonat;
• laktoza.

Zbog svoje niske cijene u pripremi, Endo okoliš je u velikoj potražnji među amaterskim mikrobiolozima.

Što je načelo okoliša?

Natrijev sulfid i fuksin prisutni u njegovom sastavu doprinose stvaranju Schiffovog reagensa. To jest, natrijev sulfid će obezbojiti fuksin. Kao rezultat ove reakcije nastaje fuksulfatna kiselina.

Svi znaju da enterobakterijske kolonije mogu fermentirati laktozu, tijekom ove reakcije nastaje mravlja kiselina. Iz tijeka kemije je poznato da mravlja kiselina interagira s aldehidima i daje kvalitativnu reakciju. Zbog toga će kolonija enterobakterija biti obojana u ružičasto-grimiznu boju. Ostale gram-pozitivne bakterije (osim enterobakterija) ne mogu hraniti laktozu, tako da neće biti obojene.

Kao rezultat toga, samo će se enterobakterije u obliku grimiznih štapića istaknuti na Petrijevoj posudi s Endo medijem, koji ima ružičastu boju. Sve ostale kolonije ili će biti uništene ili neće stajati na pozadini hranjivog medija.

Kuhanje hranjivog supstrata

U mikrobiologiji, Endo okoliš je jedan od najvažnijih hranjivih medija. Da biste pripremili takvu podlogu, slijedite upute u nastavku.

1. Kuhanje juha. Bilo koje meso ili kost s ostatkom mesa će učiniti, morate ukloniti masnoće i tetive što je više moguće. Meso kuhajte oko 20-25 minuta na 100 stupnjeva. Nakon hlađenja juhe zamrznite kapljice masti.

2. Nastalu smjesu filtrirati kroz gusti pamučni filter do apsolutne transparentnosti. Valja napomenuti da je filtriranje kroz gazu nepoželjno, jer postoji opasnost od udara u male komadiće mesa.

3. Izvagajte preostale sastojke. Moramo napraviti suhu okolinu i pripremiti Schiffov reagens. Za to trebate izvagati:

• pepton 1.3 g;
• laktoza 1 g;
• agar 2 g;
• Fuchsin 0,2 g

4. Dodajte fuksin u 30 ml vode, miješajte fuksin s vodom. Zatim dodajte koncentriranu otopinu natrijeva sulfita dok nijanse fuksina ne nestanu.

5. Precipitat fuchsulfurne kiseline taloži se, uklanjajući ovaj precipitat filtracijom.

6. Dodajte vrući medij u vruću juhu.

7. Pričekajte otapanje i dodajte Schiffov reagens.

8. Dobiveni supstrat se sterilizira oko 30 minuta na temperaturi od oko 125 stupnjeva.

Rezultati usjeva trebaju zadržati oko 5 dana, ali što ih dulje držite, jasniji rezultat će biti kolonije bakterija.